液相色譜儀和氣相色譜儀之間的那點(diǎn)“貓膩”
點(diǎn)擊次數(shù):1809 更新時間:2019-08-21
液相色譜儀系統(tǒng)是由由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、器、記錄儀等幾部分組成。適用于水溶液的體系,又適用于溶劑的體系。當(dāng)所用的洗脫劑為水溶液時,稱為凝膠過濾色譜,其在生物界的應(yīng)用比較多。也 用于氨基酸、蛋白質(zhì)的分析,也適合于某些機(jī)離子(NO3-、SO42-、Cl-等機(jī)陰離子和Na+、Ca2+、Mg2+、K+等機(jī)陽離子)的分離和分析,具有十分重要的作用。在聚合物的分析中,吸附色譜一般用來分離添加劑,如偶氮染 料、抗氧化劑、表面活性劑等,也用于石油烴類的組成分析。
液相色譜儀和氣相色譜儀之間的區(qū)別:
1、分析對象之間的區(qū)別
GC:適用于氣化程度高,熱穩(wěn)定性好,沸點(diǎn)低的樣品;但對于沸點(diǎn)高,揮發(fā)性差,熱穩(wěn)定性差,離子和高聚物的樣品,別是對于大多數(shù)生化樣品而言,不到20%的物質(zhì)。 HPLC:適用于溶解后制成溶液的樣品(包 括介質(zhì)溶液),它不受樣品的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,它是一種分子量大,氣化困難,熱穩(wěn)定性差的生化樣品,聚合物和離子。類型樣品用于的應(yīng)用,占物的80%。
2、流動相位差異的差異
GC:流動相是惰性的,氣體組分與流動相親和力,與固定相相互作用。
HPLC:流動相為液體,流動相和組分具有協(xié)同作用力,色譜柱的選擇性,分離度,對分離起積極作用。此外,流動相有很多種,房間的選擇范圍很廣。改變流動相的極性和pH也以調(diào)節(jié)分離。當(dāng)選擇具有不同 比例的兩種或多種液體作為流動相時,以分離選擇性。
3.運(yùn)行條件的差異
GC:變暖操作。
HPLC:室溫,高壓。
液相色譜儀的使用方法:
1.開機(jī),打開電腦,打開液相色譜各個模塊的電源,雙擊桌面“儀器—聯(lián)機(jī)",進(jìn)入聯(lián)機(jī)界面,然后排氣。
2.手動旋開泵處沖洗閥(逆時針旋轉(zhuǎn)約1圈),右鍵單擊“泵"圖標(biāo)區(qū)域,選擇“方法?"選項,進(jìn)入泵編輯畫面,設(shè)流速:5ml/min(一般為3-5ml/min),點(diǎn)擊“確定"。 右鍵單擊“泵" 圖標(biāo),點(diǎn)擊“控制?"選項,選中“ON", 點(diǎn)擊“確定",則系統(tǒng)開始沖洗,直到管線內(nèi)(由溶劑瓶到泵入口)氣泡為止,(一般為5分鐘),切換通道繼續(xù)沖洗,直到所有要用通道氣泡為止。
3. 右鍵單擊“泵" 圖標(biāo),點(diǎn)擊“方法?"選項,設(shè)流速:0ml/min,手動旋緊沖洗閥。然后右鍵單擊“泵"圖標(biāo),點(diǎn)擊“方法?"選項,按照方法要求選擇合適比例的流動相,設(shè)流速:1.0ml/min。
4. 同理右鍵單擊“柱溫箱",“器"圖標(biāo),點(diǎn)擊“方法?"選項,按照方法的要求設(shè)置溫度,波長,點(diǎn)擊“控制" 選項,“ON"打開柱溫箱和器。